來源:《中國(guó)科學(xué)報(bào)》 第4版 綜合
發(fā)布時(shí)間:2024-04-03
本報(bào)訊(見習(xí)記者孫丹寧)中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所副研究員喬慶龍和研究員徐兆超團(tuán)隊(duì)發(fā)展了能與RNA特異性可逆結(jié)合、在活細(xì)胞內(nèi)對(duì)細(xì)胞核核仁穩(wěn)定成像的“緩沖熒光探針”Nu-AN,實(shí)現(xiàn)對(duì)核仁動(dòng)態(tài)輪廓的成像,并通過活細(xì)胞內(nèi)藥物誘導(dǎo)下核仁特定形態(tài)的可視化,為核仁應(yīng)激試劑的篩選提供可視化工具。近日,相關(guān)成果發(fā)表于《先進(jìn)科學(xué)》。
核仁是細(xì)胞核內(nèi)最大的無膜細(xì)胞器,因具有多樣的生理和病理功能而受到廣泛關(guān)注。在核仁應(yīng)激條件下,核仁形態(tài)的變化尤為明顯,為疾病診斷和藥物篩選提供了潛在方法。然而,核仁形態(tài)的熒光成像仍面臨挑戰(zhàn)。
團(tuán)隊(duì)將3-吡咯啉環(huán)引入萘酰亞胺中,開發(fā)了可逆結(jié)合并識(shí)別RNA的核仁“緩沖熒光探針”Nu-AN。研究發(fā)現(xiàn),3-吡咯啉環(huán)并入萘酰亞胺熒光團(tuán),既保持了平面性又保留了扭曲分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移的特性,同時(shí)還表現(xiàn)出傳統(tǒng)萘酰亞胺染料氫鍵淬滅熒光的特征。在活細(xì)胞中,Nu-AN可以有效、可逆地染色核仁,同時(shí)避免商品化RNA探針在線粒體或溶酶體中錯(cuò)誤定位的問題。這種可逆性結(jié)合不僅最大限度減少了對(duì)核仁的結(jié)構(gòu)干擾,保留了核仁的活性,還在核仁外形成了“染料池”。當(dāng)核仁內(nèi)的探針發(fā)生光漂白,則可以快速招募來自“染料池”的新探針,確保核仁成像的光穩(wěn)定性。
借助Nu-AN對(duì)核仁形態(tài)的可視化,團(tuán)隊(duì)觀察到兩種藥物誘導(dǎo)核仁形態(tài)的特異性變化,這些成像結(jié)果說明了核仁作為無膜細(xì)胞器的高度流動(dòng)性和有組織性。
相關(guān)論文信息:https://doi.org/10.1002/advs.202309743
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