來源:《中國科學(xué)報》第3版 綜合
發(fā)布時間:2024-12-26
本報訊(記者孫丹寧)近日,中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所研究員張麗華、袁輝明團隊在單細胞分泌組分析新方法研究中取得新進展。他們通過結(jié)合非天然氨基酸代謝標記、基于點擊化學(xué)的選擇性富集等技術(shù),實現(xiàn)了單細胞分泌組的全景式分析,為在單細胞水平深入研究細胞分泌異質(zhì)性提供了重要技術(shù)支撐。相關(guān)成果發(fā)表于《德國應(yīng)用化學(xué)》。
由于單細胞分泌組含量極低,并且在生理培養(yǎng)條件下易受血清高豐度蛋白的干擾,目前,單細胞分泌組分析主要依賴抗體法,分泌蛋白的鑒定數(shù)量不超過42種,單細胞分泌組的非靶向大規(guī)模分析仍面臨挑戰(zhàn)。
針對這一難題,研究團隊采用L-疊氮基高丙氨酸(AHA)對細胞新生成的蛋白質(zhì)進行代謝標記,通過微流控芯片對AHA標記的單細胞進行分離和原位培養(yǎng),并研制出炔基功能化毛細管微反應(yīng)器,用于實現(xiàn)基于點擊化學(xué)的分泌組選擇性富集。蛋白質(zhì)的共價結(jié)合允許進行嚴格的清洗,以去除非特異性吸附的干擾蛋白。
研究發(fā)現(xiàn),該方法在復(fù)雜干擾背景下對低豐度蛋白質(zhì)具有高效的富集能力。團隊進一步將該方法用于單個HeLa細胞分泌組分析,平均定量出389種蛋白質(zhì),與基于抗體的分泌蛋白靶向分析方法相比,鑒定數(shù)目實現(xiàn)了顯著提升。
相關(guān)論文信息:https://doi.org/10.1002/anie.202417351
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